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国内抗体药物生产公司细胞实验和动物实验过程中 拿到药...

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论坛元老

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发表于 2024-2-22 19:57:47 | 显示全部楼层 |阅读模式
  小白:拿到产品后都不知所措了,之前拿到的产品一不小心就选错了溶剂,直接废掉不能用了,扔掉的都是白花花的经费啊。
  师兄:国内抗体药物生产公司拿到产品不能想当然的就动手,要多查资料查文献。科学研究一切都是要有理有据有出处的,即使没有相关文献也是需要查阅大量相似资料奠定理论基础,设置梯度来摸索的。一切都是不容易的。
  萌 Cece:给药是个大工程,需要大量的理论基础和文献参考,只有站在巨人的肩上,我们才能看的更远,走的更久
  不同的产品,不同的给药方式和给药剂量,即使是同一产品,不同的细胞,不同动物模型,给药剂量也是不一样的。拿到产品后,我们要根据产品名字和自己的实验设计,有目的的去查文献。
  ■ 细胞实验,剂量如何查询
  细胞实验一般是将小分子药物加入培养基,与细胞共孵育来发挥作用的。给药剂量查询如下所示:
  输入产品名字,细胞系名称,剂量单位(小分子抑制剂一般用量在 µM 的比较多,重组蛋白类的一般用量在 ng/mL 的范围),文献搜索后,参考文献的使用浓度和使用时间,设计自己的实验。
  Tips: 也会有小伙伴遇到自己的细胞系没对应文献的情况,建议根据其他细胞系文献的使用剂量,设置梯度进行 “剂量-效应” 曲线预实验,确定合适的使用浓度再进行后续的功能研究。
  ■ 当小分子抑制剂遇到转染
  当然,并不是所有的剂量组都只有小分子化合物,有些伙伴可能会纠结 “我还要给细胞转染,这个时候我要怎么加药呢?” “除了小分子抑制剂,我要加我自己合成的其他药物,该是怎样怎么加药呢?”
  如下面这篇文章里,作者团队探究 κ ***受体 (KOR) 在 食管鳞状细胞癌 (ESCC) 中的作用及其潜在机制,研究者前期使用 siRNA 敲低 KOR 表达,发现 KOR 下调增强了 ESCC 细胞的增殖、转移和侵袭能力。激活 PI3K -Akt 通路对肿瘤细胞(经 siRNA 敲低 KOR 表达处理)的增殖有促进作用,为探究 AKT 的激活是否是导致转染 siRNA-KOR 的肿瘤细胞的增殖、入侵和迁移的原因,使用小分子抑制剂 HY-10249A (0.5 μM) 对其进行处理[1]。
  注意文献这里的描述:“following KOR knockdown”,小分子抑制剂是在转染之后加的,HY-10249A ,AKT 激酶抑制可以逆转 KOR 的抑制对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。

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