抗体药物研发流程图细胞因子中全血的标本处理方法

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　　抗体药物研发流程图细胞因子常用的标本类型和处理方法

　　细胞因子中全血的标本处理方法金斯瑞生物分析:我们针对全血:使用肝素钠抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素锂、EDTA和ACD抗凝剂,血样在8小时内分析,超过8小时会导致活性的损失,一般细胞因子阳性细胞会减少5%.如不能在8小时之内检测,应将真空采血管水平室温放置.

　　自身血浆中外周血单个核细胞(PBMCs):使用肝素钠抗凝的采血后,分离PBMCs,24小时内分析.

　　组织培养基中的外周血单个核细胞(PBMCs):用Ficoll分离PBMCs,将细胞重悬于含10%热灭活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中,调节细胞浓度为2×106细胞/ml.

　　调节细胞浓度2×106细胞/mL于新鲜培养基中.

　　冰冻全血与PBMCs:使用1×红细胞裂解液处理活化的外周血或者PBMCs,用PBS漂洗,并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重悬,-70℃冻存.溶化后细胞置于染色管中,加上2——3mL的洗液,离心5分钟后,用破膜剂对细胞进行破膜和染色.