单克隆抗体生产做标准曲线样品检测需要注意的问题

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　　目前流行的免疫检测拟合方式是“四参数逻辑拟合"，单克隆抗体生产用这种拟合方式往往能够比较的反映浓度和吸光度的曲线关系，从而进一步比较正确的获得样品中待测物质的浓度值。

　　关于标准曲线的拟合方式，直线、二次曲线、三次曲线、指数、对数等虽都可用于ELISA试剂盒及其它生物学反应中的曲线拟合，但都只适用于曲线的一部分，有的 适用于前半段，有的适用于后半段，有的适用于中间一段，而ELISA试剂盒曲线则对曲线的全部都有较好的适用性。当然，如果用于定量，还是在中间一段较 好。这些方法虽然没有一种方法可以通用，但也都可以用。关键在于你的标准曲线做到了S形的哪一部分，你想检测的样品浓度在曲线的哪一部分。在S曲线的低浓 度部分可以用乘幂方程很好的拟合，ELISA试剂盒中低浓度部分可以用直线方程，中间部分可用对数方程，而中后段可用四参数。

　　其实，在一个长的区间内，应该都能拟合得较为理想。但并不是说它就是的。事实上不仅是ELISA试剂盒，其它很多生物学反应都是S形曲 线，也都可以用ELISA试剂盒曲线拟合。但建模型是一回事，而用它来定量是另一回事。如果用来定量，S形曲线的中间段（较陡处）是比较好的，而两端的平 坦部分计算误差会大，有时甚至会很大